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Thermo液相色譜柱在使用前需要注意以下事項(xiàng)
更新時(shí)間:2019-11-20   點(diǎn)擊次數(shù):2237次
   使用Thermo液相色譜柱可使您的HPLC和LC/MS應(yīng)用獲得異乎尋常的峰形和分辨率。這些封端、超純、硅膠色譜柱借助通用梯度和C18選擇性,可顯著減少峰拖尾。憑借的分辨率、效率和靈敏度,Thermo液相色譜柱可使您對(duì)分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和質(zhì)量充滿信心。
 
  Thermo液相色譜柱的使用前注意事項(xiàng):
  Thermo液相色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是Z佳條件),只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
 
  1、樣品的前處理:
  a、使用流動(dòng)相溶解樣品。
  b、使用預(yù)處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
  c、使用0.45μm或0.22µm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。
 
  2、流動(dòng)相的配制:
  液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):
  a、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長時(shí)間保留在柱中)。
  b、流動(dòng)相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)
  c、流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的使用壽命。
  d、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器,使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制。
  e、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。
  f、在流動(dòng)相配制好后,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
 
  3、流動(dòng)相流速的選擇:
  因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的色譜柱,要追求Z佳柱效,使用Z佳流速。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,流速一般選擇1ml/min,對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm柱,流速0.8ml/min為佳。
  當(dāng)選用Z佳流速時(shí),分析時(shí)間可能延長??刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間。
  注意:
  a、含水流動(dòng)相hao在實(shí)驗(yàn)前配制,尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動(dòng)相不要過夜。加入die氮化鈉,防止細(xì)菌生長。
  b、流動(dòng)相要求使用0.45μm或0.22µm濾膜過濾,除去微粒雜質(zhì)。
  c、使用HPLC級(jí)溶劑配制流動(dòng)相,使用合適的流動(dòng)相可延長色譜柱的使用壽命,提高柱性能。
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